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硬件都好,移液技巧跟不上?提升可重复性的详解干货你得看看

612 人阅读发布时间:2024-06-04 11:15

同样使用精密移液器,为什么实验结果不如师哥师姐?

日常移液不管是什么液体,技术都是以不变应万变?

实验结果无法重现,标曲图不够漂亮?

 

 

当实验室有了精确的移液器和高质量吸头,此时提升移液技术就更为关键了。如果操作不当有时候会严重影响分液精度,导致重大问题和无法再现的结果。

 

下面将为大家详细讲解如何从技术层面提升可靠性和可重复性。文末更有大惊喜,小E综合了 60 余年的液体处理经验和全面客户反馈,准备了一份 116 页详尽的《精准移液科学原理》实体书等你领取!

 

首先了解气体活塞式移液器和外置活塞式移液器的工作原理

移液系统包含两种不同的物理原理,即气体活塞式和外置活塞式。气体活塞式移液器是实验室中日常使用的“普通”移液器,通过吸头中液体和移液器活塞之间的空气压力完成移液。而在外置活塞式移液器中,活塞集成在吸头中并与液体直接接触。

气体活塞式移液器操作重点

我们常见的 Research plus 手动移液器和 Xplorer 电动移液器均属于气体活塞式移液器,由于其原理是空气压强差完成移液的,需要掌握这些移液小窍门。

 

1)将移液器垂直于液面吸取液体

在浸没过程中,尽量将移液器垂直于液面,最好是 90 度。吸液时移液器的倾斜角度越大,吸头中液体的流体静力压越低,吸液体积越大。

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2)小体积空气柱可以减少误差

通过选择小体积空气柱的移液器和吸头组合来减少误差。与1000 μL 移液器相比,使用 100 μL 移液器移取 100 μL 的体积会更准确。

 

3)正确的浸没深度

在保证不会吸入空气的前提下,吸头应尽量浸没得浅一些。要吸取液体,吸头只应浸入液体数毫米。

图片

 

4)预润湿使空气柱饱和

为了提高准确度,在移液之前,应通过多次吸取和排出液体对移液吸头进行预湿。将吸头至少预湿三次,以平衡空气和液体。根据液体类型和体积,可能需要完成多次预润湿操作。

 

5)正确吸液和放液

应缓慢、均匀地吸液。根据液体类型和体积,应等待 1 至 3 秒,让液体完全吸入吸头。放液时,吸头应紧贴容器壁,以便借助液体的粘附力将吸头完全排空。

 

外置活塞式移液器操作重点

在外置活塞式移液系统中,活塞与吸头集成,直接与液体接触。相较于气体活塞式移液器,液体的流动特性以及和吸头表面的润湿特性不会影响移液精准度。因此,这种系统适合于处理具有难以处理的液体和应用。比如处理挥发性、高粘度或高密度的液体、热或冷液体以及危险液体等。

 

另外,外置活塞式移液器由于没有空气柱,移液结果不受移液环境和操作技巧的影响,科研人员可不需任何技巧轻松的完成精准移液。

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