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Eppendorf 艾本德中国

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    徐文婷

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    上海 徐汇区

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    实验室仪器 / 设备

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    生产厂商

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单细胞样品处理详解,不“被平均”的研究路

309 人阅读发布时间:2025-09-01 16:26

又被平均了?

 

你是否曾思考:同一组数据"5,5,5,5"和"10,3,4,3"的平均值都是 5,但"10"的真相已被彻底掩盖?

 

01 单细胞测序揭开真相

 

当"群体平均"模糊了生命真相,单细胞测序正撕裂认知黑。

单细胞测序技术是在单个细胞水平上,通过分离细胞、构建文库、高通量测序及生物信息学分析,获取全基因组表达谱的技术。可用于用于探究细胞内部基因的表达特征,有助于识别未知或罕见的细胞类型,揭示细胞异质性、识别稀有细胞亚群及构建发育动态轨迹。[1]

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作为一种高分辨率、高精度的测序技术,样品的处理要求也比较高,主要处理包括:

单细胞悬液的准备

单细胞的分离

单细胞的分离

单细胞文库的构建及高通量测序

 

 

02 单细胞测序核心操作

 

作为核心样品,单细胞制备非常关键,离心操作贯穿整个流程:

 

(以“小鼠肺固有淋巴样细胞 ILC2 的分离与培养”为例[2]

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这个时候考验的不是相对离心力/转速的大小,而是运行的稳定性、温控的精准性和结果的重复性

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03 单细胞分离培养

 

小鼠肺固有淋巴样细胞 ILC2s 的分离与培养

 

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密度梯度分离步骤。[2]

A. 离心前,淋巴细胞位于 Lympholyte®-M 上方的细胞悬液层中。B. 离心后,淋巴细胞集中在 DPBS 缓冲液与 Lympholyte®-M 的界面处。红细胞、死细胞和碎屑沉积在管底。

 

 

作者使用 Eppendorf 5804 R 冷冻离心机来完成一系列充满挑战的离心过程,每只老鼠收获了1.3 x 106个ILC2s细胞(90% 表达 ILC2s 标志物),在经过培养后,获得关键产出

高纯度 ILC2 细胞(>95% 纯度,13.6×10⁶/鼠),满足单细胞测序等下游应用

 

细胞活性保障:
➤ 4℃ 精准样品温控,维持高细胞活性

 

分选纯度提升:
➤ 刹车模式可调(10 档/10 档),确保密度梯度界面清晰,各类细胞高效回收

 

运行稳定:

➤低震动+低噪音离心(<54分贝),减少细胞机械损伤

 

场景多、流程标准化:

➤ 紧凑机身适配15/50ml管、5mL流式管等的离心,程序保存,确保结果一致性

 

Eppendorf 离心机,专治实验室各种焦虑,给您稳稳的幸福!

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