划重点！6篇论文助你高效完成外泌体分离！

01 血液样本

《lncRNA, miRNA, and mRNA of plasma and tumor-derived exosomes of cardiac myxoma-related ischaemic stroke》来自首都医科大学的研究人员通过 RNA 测序分析了心脏黏液瘤（CM）相关缺血性中风（CM-IS）患者和无中风的心脏黏液瘤患者的血浆及肿瘤源性外泌体中的 lncRNA、miRNA 和 mRNA。研究发现，与非中风的心脏黏液瘤患者相比，CM-IS 患者的血浆和肿瘤组织样本中存在差异表达的 miRNA、lncRNA 和 mRNA。这些发现为探索 CM-IS 中潜在失调的 lncRNA、miRNA 和 mRNA 提供了重要资源，有助于开发新的诊断生物标志物。

参数：

CP100NX超离+P50AT2 转子，100,000 x g，4 ℃，2 h

02 尿液样本

《Human proximal tubular epithelial cell-derived small extracellular vesicles mediate synchronized tubular ferroptosis in hypoxic kidney injury》来自昆士兰大学的研究人员探讨了缺氧状态下近端肾小管上皮细胞（PTEC）分泌的小细胞外囊泡（sEV）在急性肾损伤（AKI）向慢性肾病（CKD）转变中的作用。研究人员使用微型超离从患者尿液和体外培养的人源 PTEC 中分离 sEV，发现缺氧条件下 PTEC 从顶端分泌的 sEV 显著增加，并携带独特的miRNA信号，诱导脂质过氧化和铁死亡。这一发现为阻断 AKI 向 CKD 转变的治疗提供了新的靶点。

参数：

CS150NX超离+固定角转，100,000 x g，4 ℃，90 min

03 细胞培养液

《Cell-free osteoarthritis treatment with dual-engineered chondrocyte-targeted extracellular vesicles derived from mechanical loading primed mesenchymal stem cells》：华中科技大学与河北医科大学的研究者利用超速离心机分离并表征了机械加载预处理的间充质干细胞来源外泌体（ML-EVs），发现其在维持软骨细胞外基质（ECM）稳态和缓解软骨细胞衰老方面具有显著效果。该研究过表达 miR-27b-3p 并结合软骨细胞靶向肽（CTP）构建了双重工程化的软骨细胞靶向 EVs（CTP/miROE-EVs），其在特异性靶向软骨和改善 OA 病理方面表现出色，可以减轻骨关节炎（OA）。

参数：

CP-NX超离，110,000 x g，4 ℃，75 min

04 组织样本（如肿瘤组织、脑脊液）

《Isolation and characterization of small extracellular vesicles from murine primary mammary tumor》：肿瘤源性小细胞外囊泡（TEVs）的研究和临床应用面临诸多挑战，包括分离鉴定方法的局限性、异质性、药代动力学不确定性以及临床应用的标准化问题。武汉大学的研究者提供了一种从鼠源乳腺肿瘤中分离和表征小细胞外囊泡（TEVs）的详细方案，包括组织解离、酶消化、差速离心和超速离心步骤，并通过透射电子显微镜、免疫印迹和纳米流式细胞术对 TEVs 进行表征。该方案还可用于从其他实体瘤类型中提取 EVs，具有一定的普适性。

参数：

CP80WX超离+P50A3转子，110,000 x g，4 ℃，70 min

05 植物样本

《Formulation, characterization, and evaluation of curcumin-loaded ginger-derived nanovesicles for anti-colitis activity》天津中医药大学的研究人员提出了一种利用超速离心机结合 PEG 8000 和蔗糖密度梯度离心的高效方法，用于制备姜源纳米囊泡（GDNVs），并将其与姜黄素（CUR）结合，制备出了具有高负载能力和包封效率（89.300% ± 0.344%）的姜黄素负载姜源纳米囊泡（CG），在体内分布和抗结肠炎活性方面表现出色。

参数：

CP100NX超离 150,000 x g，4 ℃，1 h

06 微生物样本

《Characterization of extracellular vesicles released from Prochlorococcus MED4 at the steady state and under a light–dark cycle》：海洋蓝藻 Prochlorococcus 是海洋生态系统中最丰富的光合生物之一，已被证实能够持续释放EVs。香港科技大学的研究者利用超速离心机分离并表征了海洋蓝藻Prochlorococcus  MED4 释放的外泌体（EVs），揭示了其在昼夜节律中的生成变化及其与细胞分裂的关联。

参数：

2步超速离心：CP80WX+P40ST 和 CS150NX+S55S