探索外泌体在椎间盘退变中的作用：苏州大学新研究

近年来，椎间盘退变（IVDD）已成为导致下背痛（LBP）的主要原因之一，严重影响了全球数百万人的生活质量。研究表明， M1 型巨噬细胞在 IVDD 中起着重要作用，但其具体机制尚不明确。

苏州大学团队在新的研究中，揭示了 M1 型巨噬细胞来源的外泌体在 IVDD 中的关键作用，并探讨了其通过 LCN2/NF-κB 信号轴加速椎间盘细胞衰老的机制。

研究团队利用大鼠针刺 IVDD 模型和脂多糖（LPS）诱导的椎间盘细胞退变模型，深入探讨了 M1 型巨噬细胞来源的外泌体（M1-Exos）在 IVDD 中的作用。通过 RNA 测序，发现 M1-Exos 富含脂质运载蛋白 2（LCN2），并通过激活 NF-κB 信号通路，促进椎间盘细胞的衰老。

其中，作者通过超速差速离心法纯化 M1 巨噬细胞来源的外泌体 (M1-Exos) 。流程如下：

在 15cm 培养皿中接种 RAW264.7 细胞，当细胞融合度达到 70% 时，用 LPS（100 ng/mL）诱导 M1 型巨噬细胞极化。

将培养上清液在 4°C 下以 2,000 xg 离心 15min，去除细胞碎片，然后以 10,000 xg 离心 30min，过滤上清液。

使用 Eppendorf CP-NX 系列超速离心机，以 120,000 xg 离心 2h，收集外泌体颗粒。

用 PBS 重悬外泌体颗粒，进行后续分析。

图 2：M1 型巨噬细胞来源的外泌体的提取和鉴定（A. M1-Exos 和 M0-Exos 的代表性 TEM 图像。20nm 比例尺。B. 动态光散射法测量的外泌体尺寸分布。C. 超速离心上清液（Sup）和外泌体（Exos）中外泌体标志物 CD63 和 TSG101 的 WB 分析。）