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公司新闻/正文
石斛兰的神奇力量：如何对抗地中海贫血患者的动脉粥样硬化
286 人阅读发布时间：2024-10-24 16:08
低密度脂蛋白（LDL）的氧化在动脉粥样硬化发病机制中起着关键作用。血红素（铁(III)-原卟啉 IX）是血红蛋白的降解产物，常见于地中海贫血患者体内，是一种强氧化剂，能促使 LDL 氧化，从而加剧地中海贫血患者的动脉粥样硬化。
来源于石斛兰的石斛酚（Lusianthridin），是一种具有抗氧化活性的酚类化合物，可能是一种对抗血红素诱导氧化应激的有效成分。
▲ 石斛兰（左，图源：pixbay），Lusianthridin 结构式（右）
为了探究这一猜想，来自泰国朱拉隆功大学的研究者在《Pharmaceuticals》上发表了文章“Protective Effect of Lusianthridin on Hemin-Induced Low-Density Lipoprotein Oxidation”， 旨在评估石斛酚对血红素诱导低密度脂蛋白氧化（he-oxLDL）的保护作用。
在本文中，分离出纯净的 LDL 是研究顺利进行的技术基础。
研究人员首先从健康志愿者（过夜禁食）中收集30mL血液样本，随后 2,454 x g，4℃ 离心 15min 分离血浆，冻存于 -80℃ 低温保存；接下来，使用 Eppendorf CP100 NX 超速离心机搭配 P100AT2 固定角转，通过顺序密度梯度超速离心法分离 LDL：
1、用含有 KBr、NaCl 和 EDTA 的盐溶液将血浆的密度调整至 LDL 的密度范围（1.019–1.063 g/mL）
2、在 16 ℃、289,000 x g 下离心，获得纯化的 LDL
3、将分离的 LDL 用 10 mM 磷酸盐缓冲盐水（pH 7.4）透析过夜，去除 EDTA 和盐
▲ CP100NX 和 P100AT2 固定角转
本文的研究人员使用 CP100NX 超速离心机确保了 LDL 的高效分离和纯化，为研究 Lusianthridin 的抗氧化作用奠定了坚实的基础。
小 E 技术讲解时间
经过优化的“顺序浮选密度梯度超速离心法（Sequential floation density gradient ultracentrifugation）” 通过配置不同单一密度的梯度介质液，分级进行超速离心，可逐步分离出密度十分接近的目标物质。在脂蛋白纯化中，该方法可以用来分离不同密度的脂蛋白，如极低密度脂蛋白（vldl）、低密度脂蛋白（ldl）、高密度脂蛋白（hdl）等。
分离 LDL 后，研究人员使用血红素作为氧化诱导剂，模拟 LDL 的氧化反应。使用不同浓度的 Lusianthridin（0.25、0.5、1 和 2 μM）作为抗氧化剂，与 LDL (400 μg/mL)预孵育后，加入 5 μM 血红素诱导氧化，并在不同的时间点检查 LDL 的氧化程度。本文采用了多种分析方法，包括硫代巴比酸反应物质（TBARS）测定、电泳迁移率分析、HPLC 脂质成分分析和泡沫细胞形成实验。
▲ Lusianthridin 对高铁血红素诱导的 LDL 氧化过程中不同孵育时间下相对电泳迁移率（REM）的影响
实验结果表明，Lusianthridin 在高浓度（1 µM 和 2 µM）下能够显著抑制 LDL 的氧化反应，减少 TBARs 的生成，并降低 LDL 的电泳迁移率。此外，Lusianthridin 有效保护了 LDL 中的脂质成分，防止其被氧化，特别是在胆固醇酯的保护方面表现突出，预示着其在预防地中海贫血相关动脉粥样硬化方面展现出良好的潜力。
在探索低密度脂蛋白（LDL）氧化反应机制的过程中，超速离心机发挥了至关重要的作用。它不仅保证了 LDL 的高效、精确分离，更奠定了后续研究的基础。Eppendorf 旗舰超离机型 CP100NX 以其出色的性能，为本研究提供了强有力的支持。
不仅是 CP100NX 超速离心机表现出可靠的蛋白离心结果，Eppendorf 的微型超离 CS150(F)NX 同样具备高效的脂蛋白分离能力，欢迎了解更多样品离心相关应用。